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愈创木酚溶于磷酸缓冲液吗

时间:2024-03-25 10:48:59 愈创木酚 我要投稿

愈创木酚溶于磷酸缓冲液!常用作检测过氧化物酶活性

3愈创木酚法测定过氧化物酶活性

过氧化物酶活性的测定(比色法)

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一、原理:过氧化物酶广泛分布于植物的各个组织器官中。在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶褐色物质,此产物在470 nm 处有最大光吸收值,故可通过测470 nm下的吸光度变化测定过氧化物酶的活性。

二、实验材料:植物叶片

三、设备与试剂:电子分析天平,分光光度计,低速冷冻多管离心机,研钵,容量瓶,量筒,试管,吸管。

(1)100mmol/L 磷酸缓冲液(pH=6.0):[0.2M的Na2HPO412.3mL和NaH2PO487.7mL混合后稀释2倍]

(2)反应混合液:100mmol/L磷酸缓冲液(pH6.0)50ml于烧杯中,加入愈创木酚28μl,于磁力搅拌器上加热搅拌,直至愈创木酚溶解,待溶液冷却后,加入30%过氧化氢19μl,混合均匀,保存于冰箱中